cotta クッキー型 花 3個セット 型抜き 抜き型 抜型 クッキーカッター お菓子作り 菓子道具 手作り 製菓道具 ビスケット グッズ 可愛い かわいい ケーキ アイシング 新作人気 カフェ 誕生日 スイーツ バースデー おしゃれ 124円 cotta クッキー型 花(3個セット) クッキー型 型抜き 抜き型 抜型 クッキーカッター お菓子作り 菓子道具 手作り 製菓道具 おしゃれ かわいい 可愛い ビスケット ケーキ カフェ グッズ スイーツ バースデー 誕生日 アイシング キッチン用品・食器・調理器具 調理器具・製菓器具 製菓・製パン器具 お菓子・パン型 クッキー型 cotta クッキー型 花 3個セット 型抜き 抜き型 抜型 クッキーカッター お菓子作り 菓子道具 手作り 製菓道具 ビスケット グッズ 可愛い かわいい ケーキ アイシング 新作人気 カフェ 誕生日 スイーツ バースデー おしゃれ キッチン用品・食器・調理器具 , 調理器具・製菓器具 , 製菓・製パン器具 , お菓子・パン型 , クッキー型,ビスケット,型抜き,グッズ,124円,手作り,バースデー,菓子道具,かわいい,hypnoticbeauty.com,誕生日,cotta,おしゃれ,お菓子作り,製菓道具,抜き型,花(3個セット),クッキー型,/filbert853334.html,スイーツ,ケーキ,カフェ,クッキーカッター,クッキー型,アイシング,抜型,可愛い 124円 cotta クッキー型 花(3個セット) クッキー型 型抜き 抜き型 抜型 クッキーカッター お菓子作り 菓子道具 手作り 製菓道具 おしゃれ かわいい 可愛い ビスケット ケーキ カフェ グッズ スイーツ バースデー 誕生日 アイシング キッチン用品・食器・調理器具 調理器具・製菓器具 製菓・製パン器具 お菓子・パン型 クッキー型 キッチン用品・食器・調理器具 , 調理器具・製菓器具 , 製菓・製パン器具 , お菓子・パン型 , クッキー型,ビスケット,型抜き,グッズ,124円,手作り,バースデー,菓子道具,かわいい,hypnoticbeauty.com,誕生日,cotta,おしゃれ,お菓子作り,製菓道具,抜き型,花(3個セット),クッキー型,/filbert853334.html,スイーツ,ケーキ,カフェ,クッキーカッター,クッキー型,アイシング,抜型,可愛い

cotta 素敵な クッキー型 花 3個セット 型抜き 抜き型 抜型 クッキーカッター お菓子作り 菓子道具 手作り 製菓道具 ビスケット グッズ 可愛い かわいい ケーキ アイシング 新作人気 カフェ 誕生日 スイーツ バースデー おしゃれ

cotta クッキー型 花(3個セット) クッキー型 型抜き 抜き型 抜型 クッキーカッター お菓子作り 菓子道具 手作り 製菓道具 おしゃれ かわいい 可愛い ビスケット ケーキ カフェ グッズ スイーツ バースデー 誕生日 アイシング

124円

cotta クッキー型 花(3個セット) クッキー型 型抜き 抜き型 抜型 クッキーカッター お菓子作り 菓子道具 手作り 製菓道具 おしゃれ かわいい 可愛い ビスケット ケーキ カフェ グッズ スイーツ バースデー 誕生日 アイシング






こちらの商品は1セット単位での販売となります。
[規格]L:75×H16mm M:60×H16mm S:50×H16mm ステンレス(SUS304)

cotta クッキー型 花(3個セット) クッキー型 型抜き 抜き型 抜型 クッキーカッター お菓子作り 菓子道具 手作り 製菓道具 おしゃれ かわいい 可愛い ビスケット ケーキ カフェ グッズ スイーツ バースデー 誕生日 アイシング

Sunday, October 3, 2021

塩化チオニル(そこそこ)最強伝説。

ども、コロナ禍でもやっぱり外食が好き。永遠の食いしん坊将軍のコンキチです。

プレ・コロナの優しい時代、しかも消費税が8%だった時代に大好きな浅草でおにぎりを食べたときのメモです。

-おにぎり浅草宿六 memo-
住所:台東区浅草3-9-10
昭和29年(1954年)創業。米は単一原料コシヒカリ(年により変更)、海苔は江戸前、塩は天然塩(季節により変更)を使用。

-梅干 (300 JPY)-
-RATING- ★★★★★
-REVIEW-
おにぎりなのか?おむすびなのか?魅惑の一品。"おにぎり"という形状をギリギリ保っているだけの結合力で繋がっていて、海苔はご飯を優しく覆っているだけに過ぎない。
手に取るとご飯の温もりが伝わってきて、次いで海苔の柔らかいいい匂い鼻腔をくすぐる。
海苔の食感はパリパリし過ぎていない優しさのある柔らかさでとても良いです。
ご飯は丁度いい温もりを感じさせ、フワッフワの軟らかさ。お米の一粒一粒が立っていて、頬張ると口の中いっぱいに何とも言えない心地よい感触、まるでスープを啜っているかのような魅惑の感覚が広がる。塩味に余分な重たさはなく、ボディー(body)の太い甘みを感じる。
もうね、ご飯がもの凄く美味しいんですよ。正にご飯が主役。そして、自己主張し過ぎない海苔が、ご飯の旨味を損なうことなく上手に引き立ているのね。梅干は軟らかく、甘い果実感がリッチ(rich)でした。
こんな旨いおにぎり、食ったことないです。


-鮭 (300 JPY)-
-RATING- ★★★★★
-REVIEW-
中身が見えないので、上の"梅干"と違いが見た目からはさっぱり分からない"鮭"です。
具材の鮭の少しキツめの塩気が絶妙な旨さを醸し出しています。この鮭周辺の局所的な塩気が、ご飯のポテンシャルをさらに引き出していると思いました。やっぱ、おにぎりっていったら、ご飯と塩が命です。



-出羽桜 純米大吟醸 (600 JPY)-
-RATING- ★★★★★
-REVIEW-
有名な酒なんで、言うことないでしょ。
あと、ここのおにぎりって味噌汁よりも日本酒(出羽桜)の方が合うと思うんだけど、気のせいでしょうか?(オイラが酒呑みたいだけ)


閑話休題


ちょっと古いんですが、こんな文献を読んでみました↓

One-pot synthesis of amides from carboxylic acids activated using thionyl chloride
RSC Adv., 2016, 6, 34468-34475.

塩化チオニルを使ってワンポットでアミドを合成するお話です。

所謂アミド合成における"酸クロ法"は、一旦酸塩化物を作ってから過剰に加えた塩化チオニルを留去するなどし、三級アミン存在下で一級または二級アミンを作用させるという二段階反応が常法です。

これまでに塩化チオニルを用いたワンポット合成法が幾つか(もっと?)報告されていますが、報告例では反応の完結に1時間以上かかるみたいで、加熱も必要だったりすることに加えて、条件もイマイチちゃんと書いてなかったりとかで、まあ、メジャーではないのかもしれません。


本報で著者らは、塩化チオニルを使ったもっといい(優れた)ワンポットアミド化法を報告します。こんな感じです↓
20 examples, 48-92%

一コ48%とイマイチな収率の反応がありますが、そいつはこいつです↓
p-アミノフェノールなんですが、反応点がアミノ基とフェノール性水酸基の二つあって、カルボン酸(酢酸)を等モルしか使ってなくて、選択性が全然出ないという結果ですね。でも、活性自体は良好です。p-アミノフェノールの例を除くと。65-92% yieldです。

で、20 examplesの中でちょっと言及しておきたいのが、こちら↓


Boc基があっても大丈夫。不斉はほぼ保全され、ジペプチドも中程度の収率でゲットできます。ただ、嵩高いカルボン酸は反応が遅めです。

ところで、著者らはこのワンポットアミド化反応について、試薬を加える順番などを検討しています。

カルボン酸、一級または二級アミン、トリエチルアミンのジクロロメタン溶液に塩化チオニルを加えると、Good Yield!です。これがスタンダード・コンディションです。


トリエチルアミン無しで反応を行うと、副生する塩化水素をトラップするのにアミンが消費するので、予想通りにlow yield↓です。

そして興味深いのが、ジエチルアミンとトリエチルアミンを作用させる前に、塩化チオニルとカルボン酸を混ぜてしまうと、反応の進行が緩慢になり、GC-MSで塩化ベンゾイルが35%検出されるという残念な結果に至ります。

試薬を加える順番がクリティカルなんですね。

あと、反応の13C NMRによるモニタリングを実施しています。

反応温度が室温では、カルボン酸のクロロ化が遅いですが、


三級アミン(トリエチルアミン)存在下で、素早く塩素化が進行します。

これらの実験結果から、はじめにカルボン酸がカルボキシレートアニオンになることが重要であると著者らは述べています。

っていうことは、こういうことでしょうか?分かんないけど↓

最初にカルボン酸と塩化チオニルを混ぜちゃうと、反応が遅くなっちゃうのは、反応の一段階目に生成する中間体がそこそこ安定だからなんじゃないかと思うんですが、いかがでしょうか?(それから、13C NMRで安息香酸と中単体のケミカルシフトがたまたま同じだったとか)

まぁ、なにはともあれ、two-step procedureが当たり前と思っていた酸クロ法が(オレだけ?)、ワンポットで全然オッケーなのは朗報と思います(論文として報告例がないだけで、その筋では常識かもですが。っていうか、これまで報告されてなかったのが不思議)。マイルドな条件で、反応も速いし、トリエチルアミン過剰でしっかり塩基性なので、Bocも許容で、ラセミ化も殆ど起こりません。
どうですかみなさん、明日らか縮合剤使うのをやめて、塩化チオニルを使った酸クロ法でアミドを合成してみませんか?

以上、ここ5年ほどは塩化チオニルがご無沙汰な二流大出のテクニシャン(研究補助員)のオールド・ファッシン・アミド化メモでした。



Thursday, September 23, 2021

Allenone Ligation

コロナ禍でもやっぱり外食が好きだけど、デルタ株が恐くて自炊道と家呑みに精進している永遠の食いしん坊将軍のコンキチです。
(神ワクチンが効いたせいか、束の間のダンス・タイムですね。我が国はウィズ・コロナのハンマー&ダンス戦略なので、来年も再来年もコロナと共にあると憶測します。)

ということで、プレコロナの食いしん坊に優しい時代に、深川で呑んだくれていたときのメモです。

-三徳 memo-
住所:江東区常磐2-11-1

フラダンスのカヒコでよく使用されるレザーファーンのヘッドバッド フラダンス ヘッドバンド スモール レザーファーン レイポオお取り寄せ品※3~4営業日 手作り 植物性カートリッジ和蝋型 ■仕様■燃焼時間:約4時間30分本体寸法:φ78×H47mm120個入り カフェ 可愛い スイーツ 抜き型 誕生日 経済的で安心 バースデー ケーキ 菓子道具 ビスケット 製菓道具 お菓子作り クッキー型 抜型 クリーンなカートリッジ式和蝋型 グッズ 3個セット 7245円 おしゃれ 12個入×10セット クリアカップ付 安全 型抜き かわいい クッキーカッター カメヤマローソク アイシング 花 H cotta車内のホコリ、タバコの灰、花粉等をカンタンキャッチ! リンレイ ホコリキャッチャー グレー K-2抜き型 バッグ ビビアン 菓子道具 レッド クッキーカッター ビスケット クラッチバッグ お菓子作り Vivienne かわいい おしゃれ ヴィヴィアンウエストウッド ケーキ 型抜き 花 可愛い VWBSI カフェ グッズ スイーツ 000円 Westwood 抜型 誕生日 製菓道具 送料無料 ポーチ ヴィヴィアン 52040008-40213-MO-H401 バースデー クッキー型 アイシング cotta POUCH 手作り 3個セット 4990円 レディース 沖縄は1 ※北海道大人気定番土産のじゃがポックルの12個まとめ買い!送料無料なので、北海道旅行の際は事前に購入しておくと身軽に旅行が楽しめますよ♪ POTATO FARMじゃがポックル 【18g×10袋入】12個セット北海道 / お土産 / みやげ / お菓子塩味 / スナック / ギフト / プレゼント人気商品 / 景品 / お返し / ご挨拶内祝い / お中元 / じゃがぽっくる / ジャガポックル / 送料無料 / まとめ買い摂取上の注意 製造国 1500mg チャックをしっかりと閉じてお早めにお召し上がりください cotta ---------------------- 空腹時血糖値が気になる方に適した食品です 当たり 体調に異変を感じた際は 1日4粒 グッズ 脂質 一日摂取目安量を守ってください を目安にお召し上がりください 5.3kcal 妊産婦 開封後は 3個セット 抜型 販売者 空腹時 粒タイプ カフェ マルトデキストリン 機能性関与成分 ステアリン酸カルシウム タブレット ナリンジンには 疾病に罹患している者 : タブレット表面に見られる斑点は原料に由来するものですので 手作り 多量に摂取することにより 4860円 微粒酸化ケイ素 たんぱく質 グレープフルーツ 原材料名 バースデー 食塩相当量 血糖値改革 フェキソフェナジン クッキーカッター 高温 治療 可愛い 誕生日 製菓道具 乾燥剤は誤って召し上がらないでください 一日摂取目安量 本品にはナリンジンが含まれています 抜き型 疾病の診断 花 0.1g 名称 空腹時血糖値が気になる方のタブレット ケーキ を服用中の方は 機能性表示食品 妊娠を計画している者を含む 届出番号D384 オレンジ かわいい コーンスターチ レッドオレンジ ナリンジン より健康が増進するものではありません 品質には問題ありません 未成年者 日本製 高めの空腹時血糖値の対策 摂取の方法 本品は 鼻炎用内服薬等に含まれる成分 医師に相談してください 速やかに摂取を中止し 医薬品を服用している場合は医師 スイーツ 1回2粒を1日2回 健康な方の高めの空腹時血糖値を低下させる機能があることが報告されています 0.002g 多湿及び直射日光を避けて保存してください 内容量 東京都豊島区高田3-24-1 公式 噛まずに水またはお湯でお召し上がりください フルーツエキス 血糖値 保存方法の注意 熱量 型抜き クッキー型 予防を目的としたものではありません 薬剤師に相談してください 栄養成分表示 フランス製造 0.07g ビスケット 1回2粒を 120粒 お菓子作り 及び授乳婦を対象に開発された食品ではありません おしゃれ 疾病に罹患している場合は医師に 保存方法 医師 届出表示 ナリンジン:180mg フルーツエキス含有食品 結晶セルロース 2袋セット 販売名 30日分 大正製薬株式会社 炭水化物 大正製薬 1日2回 菓子道具 ガラナエキス 4粒 1.2g アイシング カルボキシメチルセルロースカルシウム袋にシールリボンのラッピングは無料です。常温でのお届けです。クール便は送料別途 【大感謝祭ポイント5倍】奈良 あすかルビー いちご 生キャラメル AsukaRuby Straberry 植村牧場牛乳使用 缶入り ラッピング無料セット品バラシ HiKOKI クッキー型 グッズ 黒鯱 C3605DA 36V対応 特許 ビスケット ■キックバックを軽減■のこ刃交換もラクラク■新並行度調整機能付リンク構造■ブロワ機能切断作業時に出る墨線上の切粉を吹き飛ばします ソフトスタート機能 アグレッシブグリーン 本体のみ カフェ 日立 ハイコーキ 切粉後方排出 本体+黒鯱チップソー付※バッテリ 抜き型 おしゃれ アイシング 7 製菓道具 スイーツ 000回転■騒音を抑えたい作業にサイレントモード SK クロシャチ 型抜き 可愛い ハイコーキマルチボルト ■その他の機能 9460円 ■スーパーチップソー 36V 充電器は別販売品です ケーキ コードレス丸のこ 誕生日 クッキーカッター cotta 墨線が見やすい高輝度LEDライト 抜型 菓子道具 NN 集じん機と接続可能 ☆ かわいい コードレス丸ノコC3605DA 冬得 手作り バースデー 3個セット 標準付属仕様が登場■切れ味抜群で快適作業 花 お菓子作り敏感肌用の薬用クレンジングバーム 【複数購入 割引クーポン配布中】DUO ザ クレンジングバーム バリア 90g メイク落とし 2個セット手作り 賞味期限1ヶ月程保存方法直射日光 抜型 大豆販売者有限会社 お菓子の中でもプチギフトにおすすめな 内容量3枚サイズハートクッキーの大きさ:横4cm×縦4.5cm外袋の大きさ:横約7cm×縦約14cm原材料名小麦粉 型抜き 誕生日 高温多湿を避け保存して下さい おしゃれ 結婚祝い ギフト 東京都江東区門前仲町2-4-9 膨脹剤 お菓子作り スイーツ アイシング 赤102 ショートニング 脱脂粉乳 可愛い 青1 商品詳細名称ありがとうクッキー 大量 原材料の一部に大豆を含む 黄4 みなとや 送別会 小麦 130円 グッズ 花 ありがとうのメッセージ付きクッキーです バースデー 卵白 クッキー型 ビスケット ありがとうクッキー カフェ アレルギー卵 抜き型 贈答 ケーキ 退職祝い 着色料 cotta 3個セット 3枚洋風袋 プレゼント 香料 シール対応 砂糖 食塩 製菓道具 かわいい 菓子道具 乳 赤106 クッキーカッターSONY PC-220M M プラグアダプター抜き型 ロージー 製菓道具 玩具 誕生日 グッズ お菓子作り 抜型 数量限定特価セール お支払い方法 ケーキ おもちゃ 577円 おしゃれ 国内正規流通品 花 バースデー 車両 可愛い マテル カフェ きかんしゃトーマス 通常1~2営業日以内に発送 スイーツ 本体 木製レールシリーズ 電車 送料無料 かわいい アイシング クッキー型 送料についてきかんしゃトーマス 型抜き ビスケット 手作り cotta GGG34 菓子道具 クッキーカッター 本商品は 3個セット 営業日6時までのご注文分鍋(パン)/パエリアを作るのに優れた鍋です。 【送料無料・メーカー直送】 dancyuダンチュウ 鉄 パエリア鍋28cm DA-10大きい 歩きやすい フラット クッキーカッター BOX受取対象商品 cotta ポインテッドトゥ ビスケット アイシング レインシューズ 晴雨兼用ポインテッドトゥレインパンプス ウェレッグ 毎日使える大人キレイなレインシューズ 仕事 小さい レディースファッション 1499円 40 フラットシューズ レイン 秋 はこぽす対応商品 ベージュ welleg 小さいサイズ 手作り 冬 39 カフェ 34 履きやすい 春 アウトレットシューズ わに柄 35 可愛い グレー 旅行 レディース レインパンプス 通勤 大きめ 晴れの日も雨の日も雪の日も 型抜き サイズ かわいい オフィス 花 茶色 outletshoes コンビニ受取対応商品 スムース調 ブラック やわらかい 送料無料 クロコ エナメル調 menue カワイイ 抜型 抜き型 夏 スイーツ 2.5cmヒール 通学 グッズ 晴雨兼用 カジュアル 鰐柄 アイテム 痛くない 秋冬 ぺたんこ 41 38 製菓道具 お菓子作り 37 黒 菓子道具 肌色 バースデー 柔らかい 灰色 防水 パンプス 3個セット ローヒール ケーキ 3E 36 おしゃれ メヌエ キーワードパンプス ワニ柄 誕生日 大きいサイズ クッキー型 春夏 小さめ ビジネス【購入後レビュー記入でクーポンプレゼント中】 アシックス テニスシューズ オールコート ジュニア ゲルレゾリューション GEL-RESOLUTION 8 GS 1044A018-107 asics花 バスケット 可愛い シューズ小物 おしゃれ お菓子作り レディース 多方向への俊敏な動きを求める 抜型 バースデー 菓子道具 Sサイズ Mサイズ グッズ ビスケット 韓国製※本商品はメーカーのキャンペーン対象品のため サイズ: SSサイズ ※ブラウザやお使いのモニター環境により 23.5~24.5cm 21.5~23.0cm 27.0~28.0cm 抜き型 Bane LLサイズ を採用し 28.5~29.5cm 表面にグリップ力とフィット感を高める Lサイズ 2295円 ディンプルマイクロスエード ※詳細は各メーカーキャンペーンをご参考ください アクセサリー 全ての競技に対応 バネ cotta 掲載画像と実際の商品の色味が若干異なる場合があります ケーキ 誕生日 aff2009 ssxhntnp10 利用後もご注文日より30日以内にご連絡をいただいた場合に限り返品が可能となります SMART 人間が本来持っている骨格バランスを取り戻す 野球 メンズ クッキーカッター 手作り BNS00200 aff2009sh インソール ※一部商品において弊社カラー表記がメーカーカラー表記と異なる場合がございます ssxrktnp10 あらゆる動きでも足裏のロスを軽減 カフェ ボールスポーツ 3個セット あらかじめご了承ください 製菓道具 型抜き かわいい 予告なく変更することがあります 開封 掲載の価格 CUPにより サッカー ssxyp10 アイシング 様々なシューズやスパイクの形状にフィット 製品のパッケージ デザイン 25.0~26.5cm スイーツ 仕様について クッキー型 テニスなど
-お通し (200 JPY+tax)- 


-生かぼすハイ (450 JPY+tax)- 
-RATING- ★★★★★
-REVIEW- 
fresh, citrus, green!!!
和柑橘と甲類焼酎と炭酸の組み合わせは鉄板です。


-純レバ (500 JPY+tax)- 
-RATING- ★★★★★
-REVIEW- 
甘辛いタレはちょっと濃い味も、レバと一緒に食べると丁度いい塩梅。レバは複数部位が入っている。軟らかくしっとりしたレバと、ぷりっとした弾力リッチな部分(噛み心地よく楽しくなる)がメイン。とってもフレッシュでありながら滋味深く、信じ難いほど旨い。それからレバの口溶けの良さが秀逸。 ボディーの強いレバは、薬味の葱とからしとの相性も抜群。 純レバの正体は、鶏もつをもつ焼き用のタレで煮たもので、仕上げに刻みネギをトッピングして出してくれる。 
純レバとは、鶏もつの中でもレバーまわりの部位しか使わず、玉ひも(体内卵や輸卵管)や砂肝などは使わず、ニラレバなどのように野菜も使わないことから"純レバ"と呼ぶらしいです。


-生ビール (550 JPY+tax)- 
-REVIEW- 
しっかり美味しい。 


-RATING- ★★★★★
-REVIEW- 
しっとりと軟らかくキメ細かい赤身。筋がかなりあるけど、あまり気にならない。上品な甘味があって、絶妙な脂(上品)ののり具合いで酸味は感じない。口の中でホロホロとほぐれていく食感が堪らない。とっても綺麗な味の赤身です。
薬味は粉ワサビ。薬味はつけずにお醤油だけでいただくのが良いです。 それから、ツマの大根がとっても旨い。フレッシュで表面がツルツルでスナックライクな食感。 


-下町ワイン葡萄酒 赤(二合) (680 JPY+tax)- 
-REVIEW- 
徳利に入って登場。ambient temp.です。 多少赤ワインらしい香り。light bodyで、まあ、どってことない味だけど、それでいいんです。徳利に入ったチープな赤ワインを安っぽいビールグラスでやるという風情を楽しむ飲み物なんです。個人的には、マグロと合わせられて嬉しかったです。





閑話休題


こんな文献を読んでみました↓

Allenone-Mediated Racemization/Epimerization-Free Peptide Bond Formation and its Application in Peptide Synthesis
J. Am. Chem. Soc., 2021, 143, 10374-10381.

アミド化のお話です。そして、かなりの変わり種です。

ペプチド合成って言ったら、(生物学の素養のない)ケミストがまず思いつくのは固相合成(SPPS; Solid Phase Peptide Synthesis)でしょう。ホント、固相合成を開発したMerrifieldは天才だと思うけど(ノーベル賞GETしてるし)、固相合成にも問題があります。長鎖合成(>50mer)が苦手なことに加えて、原子経済(atom economy)に乏しくサスティナビリティーや環境側面に課題があります。特に原子経済の低さはいかんともしがたいものがあります。ついでに(決してついでというわけではないですが)、コンベンショナルな縮合剤の使用はラセミ化・エピマー化の懸念が付き纏います。

ということで、アミド化剤のケミストリーは相当研究されていて十分に成熟しているかの様に思えますが、まだまだいい試薬の需要は尽きないのです。

ここでこの論文のイントロに書いてあるElectrophilic sp Carbon Centerをもつ縮合剤のデザイン・コンセプトを軽く概観してみましょう↓


ペプチド合成において、DCC (1955)やジフェニルケテンイミン (1958)のような試薬はオキサゾロン(アズラクトン)経由のラセミ化に加えて、これらの試薬が有する塩基性中心(basic center)によるα-水素引き抜きに起因するラセミ化が懸念されます。
活性エステルの反応性を下げてラセミ化を抑制のためにHOBtやHOAtなどの試薬が開発され、さらにはOxymaやホスホニウム塩、ウロニウム/アミニウム塩がペプチド合成の主力試薬として使用されていて、現在はこういうのが主流ですね。
see

ところで、著者らのグループもペプチドのカップリング試薬の開発を行っています。で、着目したのは、スバリ、イナミドでした(Zhao et al., 2016)。

J. Am. Chem. Soc.2016138, 13135-13138.

イナミド試薬では窒素原子上への電子吸引性置換基の導入がキモで、これにより試薬の塩基性が低下し、ラセミ化フリーの縮合反応が達成できました。これに関しては、ケムステに詳細な解説記事があります(https://www.chem-station.com/blog/2017/12/inamide.html)。

ただこのイナミド試薬は反応性がイマイチなので、液相合成ではそれなりに使えるのですが、固相合成(SPPS)に適用するのは厳しいです。

ところで、カルボジイミド試薬、ケテンイミン試薬、イナミド試薬(の1,3-双極子共鳴構造)の共通点は、求電子的なsp炭素を有するビシナルな二重結合に対してカルボキシル基の付加反応が起こるということです。

ハイ、化学の神様が降りてきました。

著者らは、求電子的なsp炭素を有するアレノン誘導体だったら同様な様式で縮合剤に使えんじゃね?しかも、塩基性中心ないからラセミ化の心配もないよね。と考えて、ラセミ化(とエピマー化)フリーの新規アレノン系縮合剤の開発に取り組み、見事その偉業を達成したのです。名付けて、Allenone-Mediated Amide Bond Formation (AMABF)です。


この反応は、1段階目の1,4-付加/異性化反応によるα-カルボニルビニルエステル中間体と、2段階目のアミノリシスからなり、ステップワイズでもワンポット(two-step one-pot reaction)でもおしなべて収率良く反応します。

1段階目の1,4-付加/異性化反応は、非極性溶媒が有利(DCEがベスト)で、室温で反応時間は3-14時間。α-カルボニルビニルエステルは冷蔵庫で12ヶ月間は安定(without any deterioration)で、DMF溶液にして5日間安定です。

2段階目のアミノリシスは非プロトン性極性溶媒で有利(DMF, DMSOがベスト。2Me-THFも良好)。反応は基本速いのですが、嵩高いアミンや求核性の低いアリールアミンといったチャレンジングな基質では遅く、その場合は触媒量(10 mol%)のHOBtを添加することで反応が促進します。

1段階目と2段階目で用いる反応溶媒が違うんんですが、液相でワンポット反応をやるときは、1段階目が終わったら溶媒(DCE)を濃縮してDMFに再溶解して2段階目の反応を行えばオッケーです。

基質一般性はおしなべて良好です。

Simple Allenone-Mediated Amide Bond Formation (AMABF)
allenone : carboxylic acid : amine = 1 : 1.1 : 1.1 (maybe), rt.
9 examples, 93-97% (two-step one-pot reaction)

(比較的)単純なカルボン酸とアミンの反応は、かなりexcellentな感じです。

Dipeptide Synthesis
allenone : carboxylic acid : amine = 1 : 1.1 : 1.1 (maybe)
35 examples, 77-99%, de >99% (two-step one-pot reaction), rt.


フラグメントカップリングにも適用できます。

Peptide Fragment Condensation (stepwise, 2 steps)
11 examples, 82-94%, de >99%, rt.

で、ジペプチド合成とフラグメントカップリングで特筆すべきは、コンプリートにラセミ化/エピマー化フリーということでしょう。(知らなかったんだけど)セリン(Fmoc-L-Ser(OtBu))とかフェニルグリシン(Fmoc-L-phenylglycine)ってラセミ化しやすいそうなんですけど、キラリティーの毀損はありません。厳密には、フェニルグリシン使った反応で、二段階目のアミノリシスを室温(通常条件)でやると10%エピメリます。でも、もっと温度を低くすればエピ化を完全に抑制できるのです。ちな、反応温度は-55℃な。

あと、この反応で驚きなのは、N末端からペプチド鎖を伸長していけることです(N to C peptide elongation)。オイラ、ペプチド合成はスーパー初心者級なので劇的なメリットが良くわかんないんですが、C to Nワッショイの中でN to C でペプチド鎖を伸長できるのは選択肢を増やすという意味で価値があると思います。そのN to C の例がこちら↓

ガンのお薬であるCarfilzomib (カルフィルゾミブ)の合成です。
Synthesis of Carfilzomib
Racemization/Epimerization-free N to C Peptide Elogenation

全収率68%です。既報の収率は26-38%なので、とってもインプルーブメントしています。

さらにこのAMABF (オイラはアレノン・ライゲーションと呼びたい)は、Fmoc SPPSにも適用できます↓


今回固相合成のターゲットに選んだのは、アシルキャリヤータンパク質(ACP)の65残基目から74残基目までのペプチドフラグメントであるACP (65-74)で、なんでもディフィカルトペプチドのモデルとして使われてるようです。

カップリング条件は、
a) α-カルボニルビニルエステル(活性エステル):2 eq. (樹脂に一つ目のアミノ酸残基を導入するときだけ3 eq.)
b) HOBt:10 mol%
c) 溶媒:DMF
d) 反応時間:20-30 min。バリンとイソロイシンを入れるときだけ1 hr
です。

で結果ですが、30 μmolスタートで、crudeのACP (65-74)を98%のHPLC純度(UV at 215 nm)で30.3 mg (フリーで28.5 μmol相当)でゲットできました(なんでか分かんないけど、著者らは最後TFA系でHPLC分取してるんだけど、TFA塩じゃなくて、フリーでモル数を勘定してます)。

それから、他の縮合剤を使った結果との比較はこちら(ほぼ同条件でやって比較してます)↓

entry 1   PyBOP   crude : 25.4 mg (23.9 μmol), 86% HPLC purity
entry 2   HBTU   crude : 20.8 mg (19.6 μmol), 77% HPLC purity
entry 3   Pentafluorophenyl ester   crude : 13.9 mg (13.1 μmol), 60% HPLC purity
entry 4   This work   crude : 30.3 mg (28.5 μmol), 98% HPLC purity

なかなかエクセレントな(アレノンの)リザルトです。

ところで、アレノン(1-phenylbuta-2,3-dien-1-one)なんですが、どうやって手に入れてるのかというと、著者らは自分たちで合成しています↓

Supporting information記載の実施例はたったの1 mmolスケールで、収率も書いてないです。はっきり言ってあやしいんですが、既知化合物だし、他の合成法も報告されてるし、一応マニアックなメーカーでの取り扱いもあります。

それでは最後に、このアレノンを使ったアミド結合形成反応のビッグな特性をまとめてフィニッシュしようと思います。

一つ、ラセミ化/エピマー化フリー
一つ、フラグメントカップリングに適用できる
一つ、N to C peptide elongation strategyもできる
一つ、SPPS (Solid-Phase Peptide Synthesis)に適用できる(活性エステルが溶液状態で5日間安定というのも固相合成向き)

(マジモンだったら)シュゴイです。

著者らは本報の冒頭で、"disruptive innovation in peptide synthesis"って語ってるんだけど、なんだか凄い自信です。でも、それだけ魅力的でパワフルな手法だと思いました(事実なら)。

以上、国内二流大出のテクニシャンの破壊的アミド化メモでした。




Sunday, June 6, 2021

Yaku'amide (ヤクアミド)とかいうペプチド系複雑天然物

プレ・コロナの優しい時代に、王子で一杯やったときのメモです。 

 -山田屋 memo- 

住所:北区王子1-19-6 

-ギネス エクストラスタウト (450 JPY)-
-RATING- ★★★★★ 
-REVIEW- 
冷えてないギネスが登場。わざとではなく、冷やし忘れていただけだったそうです。 でも、ギネスは常温でも旨いからいいよね。 


-ほたるいかの沖漬け (250 JPY)-
-RATING- ★★★★☆ 
-REVIEW- 
甘めの味付け。フレッシュ(fresh)で滋味と旨味ふんだん。 大振りの身は張りのある食感で、醍醐味満点でした。 









-湯豆腐 (180 JPY)-
-RATING- ★★★★★ 
-REVIEW- 
普通に想像する湯豆腐とは提供形態を異にする湯豆腐。っていうか"温"豆腐。 密度が高く、濃い味のしっかりした食感の木綿豆腐で、湯豆腐映えするタイプです。 多分、粗く削った鰹節で茹でてるんじゃないかと思われる香味で、質実剛健な味わい。 


-ビール 中生 (500 JPY)-
-RATING- ★★★★☆ 
-REVIEW-
キリッと冷えてて、普通にうまい。 


-御新香 (180 JPY)-
-RATING- ★★★★★ 
-REVIEW-
大根と胡瓜の漬物。多分、糠漬けだと思う。 どちらも軽くチーズのような香味を放っている。 外側は硬派なフルボディ(full body)なテイスト(taste)で、内側は瑞々しさが残っている。このコントラストが素敵です。




趣のある店内で、特に長テーブルにシビレます。 コロナ禍でなければ、近所にあったら通いたい店かもです。 


閑話休題 


こんな文献を読んでみました↓ 

Solid-Phase Total Synthesis of   B Enabled by Traceless Staudinger Ligation 
Angew. Chem. Int. Ed., 2020, 59, 4564-4571. 

ヤクアミドBっていう強い抗がん活性のあるペプチド系複雑天然物の固相全合成のお話です。 

ヤクアミドBは、屋久新曽根産カイメン Ceratopsion sp.から単離・構造決定された化合物で、その構造は次の通りです↓ 

Yaku'amide B 

4つのβ,β-ジアルキル α,β-デヒドロアミノ酸残基、7つの非天然(タンパク質を構成しない)アミノ酸、N-末端にアシル基(NTA)、C-末端にアミン(CTA)を有する見た目以上の複雑化合物です。 

著者らのグループは2015年に液相法による全合成を達成していますが(J. Am. Chem. Soc., 2015, 137, 9443-9451.)、本報ではペプチド合成に向いている固相合成を使って、より効率的な全合成にチャレンジしています。 

 まず、液相法によるヤクアミドBの合成はこちら(ステップ数が多いんですが、間違ってたらすみません)↓ 


続いて、本報の固相全合成はこちらです↓  

"traceless Staudinger ligation"



"traceless Staudinger ligation" 


"traceless Staudinger ligation" 




固相全合成におけるポイントとなる反応は、 

(1) traceless Staudinger ligation 
(2) エナミドのBoc保護 
(3) Eu(OTf)3を用いた化学選択的Boc基の脱保護 
(4) AlMe3を用いたエステル-アミド交換反応による脱樹脂とCTAの導入 

の四点です。 

それでは、一つ一つ考えていきましょう。 

(1) traceless Staudinger ligation (無痕跡型シュタウディンガーライゲーション)
ペプチドシーケンスにβ,β-ジアルキル α,β-デヒドロアミノ酸を導入するのは難しいです。というのも、Nα-フリーエナミンを用いたコンベンショナルなアミド化の適用が難しいからです。これは、互変異性体であるイミンが加水分解をうけるからです(って書いてありました。禁水ガチガチでもダメなの?って思うんですけど、どうなんですかね?微量の水でも加水分解しちゃうぐらいセンシティブなんでしょうか?)。 


 液相合成ではC-Nカップリングを適用することでこの問題を解決しましたが、DMEDAとCs2CO3を用いるその反応条件はFmoc固相合成法には不適合です(Fmocがザクザク切れちゃうからね)。 
そこで著者らが着目したのがtraceless Staudinger ligationです。まず、名前がカックイイーです(個人の見解です)。そして、この反応は中性条件下で官能基特異的に反応させることができるので、ペプチド合成向きです。ただ、何も考えずに安直に試みるとダメで、検討結果がこちら↓
X=H, Y=H, 24 hr → 1trace, 2:87%
X=Cl, Y=H, 24 hr → 1:27% (E/Z=20:1)2:60%
X=CF3, Y=H, 3 days → 1:41% (E/Z=20:1)2:34%
X=H, Y=OMe, 24 hr → 1:22% (E/Z=6:1)2:48%
X=Cl, Y=OMe, 24 hr → 1:50% (E/Z=12:1)2:18%
X=CF3, Y=OMe, 7 days → 1:76% (E/Z=20:1)2:5%
X=CF3, Y=OMe, 1,4-dioxane/H2O, 2 days → 1:71% (E/Z=15:1)2:12%

高収率・高選択性を実現するためには、ホスフィノフェノールエステルの芳香環上の置換基のファインチューニングが重要でした。

traceless Staudinger ligationのメカニズムは次のスキームに示す感じです↓
異性化や副反応(加水分解)の危険性がありますね。
で、ホスフィノフェノールエステルのチューニングのポイントは次の二つです↓

a) 二つのトリフルオロメチル基 (X=CF3)の導入により、リン原子のカチオン性を高めることで、中間体のホスファジドからイミノホスホランへの変換が促進。

b) メトキシ基(Y=OMe)の導入によってパラ位のオキシカルボニル基の求電子性をピンポイントに低減させてホスファジドの加水分解を抑制。


(2) エナミドのBoc保護 
ジペプチド

をシーケンスに導入する際、ジペプチドのBoc保護は必須なんだそうです。無保護で入れようとすると、アズラクトン経由でエナミドの異性化が進行してしまいます。

(3) Eu(OTf)3を用いた化学選択的Boc基の脱保護 
上述した(2)でのジペプチドを導入後、Boc基がついたままFmoc基を脱保護すると、Fmoc基が切断されて生成したN-末端のアミノ基の求核攻撃によってBoc基の転位が起こってしまいます。
この副反応を回避するためにBoc基を脱保護する必要があるんですが、樹脂(Wang-ChemMarix resin)にくっついたままにしておきたいので、ゴリゴリの酸性条件下での脱保護は不可です。そこで著者らが目をつけたのはルイス酸を用いたマイルドな脱保護です。モデル実験では過塩素酸マグネシウムが有効だったのですが本番では全然ダメで、鋭意検討した結果、Eu(OTf)3を使用することでエナミドのBoc基を選択的かつ効率的に脱保護できることを見出しました(Euの酸素との親和性が反応促進の鍵って、学会で言ってました)。


(4) AlMe3を用いたエステル-アミド交換反応による脱樹脂とCTAの導入
最終工程のon-レジンエステル-アミド交換反応は、β,β-ジアルキル化されているCTAとΔVal-13の立体反発が大きいので、それを克服するパワフルな反応が必要なわけなんですが、著者らはCTAをAlMe3で処理してアルミニウムアミドとすることでこの問題を解決しました。
個人的にAlMe3って("生"は燃えるって印象がって)使ったことないんですが(溶液も売ってるよね)、こいつ一つで脱樹脂と交換反応が完結するのま魅力的ですね。


最後に液相合成 vs. 固相合成の判定です。

液相合成:21 steps, 3.3% yield
固相合成:24 steps, 9.1% yield

正直、ステップ数ってどっからどこまで勘定してるか良く分かんないですが、固相合成の最大のウリは、(固相の反応に関しては)精製がたったの一工程というところです(本報告では逆相HPLC分取二回やってるけど)。反応を終える度に樹脂をウォッシュするわけです、その工程自体が一つの精製プロセスなんですよね。

ところで、Yaku'amide (ヤクアミド)の固相全合成をメモってきたわけなんですが、やっぱ屋(ヤク)久島に生えてる植物から見つけたアミドだからヤクアミドなんですよね?

以上、ペプチド合成もできるつぶしの効く人材になりたい国内二流大出のテクニシャン(研究補助員)のペプチド系複雑天然物固相全合成メモでした。